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灌注固定主要用于神经系统,其他组织意义不是很大,而且耗时耗力。对神经系统防止变性效果较好!
小鼠灌注
灌流固定小鼠时一般采用---的针头 (4 号半,这样肉眼可见就是肺部明显充气胀大变白,针头要从心轴方向进针,然后刺入心尖 3~4 毫米左右就可以了,开始灌流后剪破右心耳,约 40 毫升生理盐水,后再灌流约 20 毫升---,整个灌流固定的过程就完成了。
灌注固定主要用于神经系统,其他组织意义不是很大,而且耗时耗力。对神经系统防止变性效果较好!
小鼠灌注
灌流固定小鼠时一般采用---的针头 (4 号半,实验动物模型公司,这样肉眼可见就是肺部明显充气胀大变白,---前动物实验,针头要从心轴方向进针,然后刺入心尖 3~4 毫米左右就可以了,开始灌流后剪破右心耳,约 40 毫升生理盐水,后再灌流约 20 毫升---,整个灌流固定的过程就完成了。
三、实验指标区域指标开臂1停留时间、活动路程、进入次数、潜伏期、平均速度x轴投影速度开臂2停留时间、活动路程、进入次数、潜伏期、平均速度x轴投影速度开臂3停留时间、活动路程、进入次数、潜伏期、平均速度x轴投影速度其他臂停留时间、活动路程、进入次数、潜伏期、平均速度x轴投影速度四、实验方法及应用
1) 动物适应实验环境1周后,称重,禁食24小时。此后每天训练结束后---性地给予正常食料据体重不同,大鼠16-20g,小鼠2-3g,以使体重保持在正常进食大鼠的80%~85%。
2) 第二天,迷宫各臂及中央区分撒着食物颗粒每只4~5粒,直径约3~4mm。然后,同时将4只动物置于迷宫中央通往各臂的门打开。让其自由摄食、探究10min。
3) 第三天,重复第二天的训练。这一过程让动物在没有很强的应激条件下熟悉迷宫环境。
4) 第四天起,动物单个进行训练:在每个臂靠近外端食盒处各放一颗食粒,让动物自由摄食。食粒吃完或10min后将动物取出。
5) 第五天,将食物放在食盒内,重复前---的训练,---2次。
6) 第六天以后,随机选4个臂,每个臂放一颗食粒;各臂门关闭,将动物放在迷宫中央;30s后,臂门打开,让动物在迷宫中自由活动并摄取食粒,直到动物吃完所有4个臂的食粒。如经10min食粒仍未吃完,则实验终止。每天训练两次,其间间隔1h以上。
在各种致病因素作用下,大脑实质受到损伤后可出现神经功能改变,如偏瘫、平衡失调等。
对于神经系统---动物模型而言,造模结束只是步,验证个体模型是否成功是第二步,而控制组内个体特征一致性是第三步。
采用神经功能评分是重要的观察指标,可以用来在体评价模型是否成功或者病变---程度。尽量控制动物模型的评分一致性是很困难但不得不做的一件事。
这里介绍三种常见的啮齿类神经功能评分方法。
一、【longa评分法】
无神经功能缺陷:0分;
瘫痪侧前爪不能完全伸展:1分;
行走时向瘫痪侧转圈:2分;
行走时向瘫痪侧倾倒:3分;
不能自动行走,存在意识丧失现象:4分。
二、【bederson评分法】
抓起动物的尾巴,使动物离台面10cm高。此时,丽水动物实验,正常大鼠的前爪处于伸直状态,而存在神经功能病变的动物则可出现如下表现:
无神经功能缺陷:0分;
动物尾巴提起后,瘫痪侧前肢回收并屈于腹下,而正常侧肢体伸向台面:1分;
除第二条表现以外,俯卧于台面时向瘫痪侧侧推动物的阻力较正常侧明显降低:2分;
除条和第二条以外,动物行走时向瘫痪侧旋转:3分。
三、【平衡木评分法】
一根长为80cm、宽为2.5cm的木条,水平固定在离台面10cm高度的地方,然后让动物在木条上行走。
能跳上平衡木条,动物实验外包,可以自由行走但不跌倒:0分;
能跳上平衡木条,动物在上面行走会跌下,但跌下的机会小于50%:1分;
能跳上平衡木条,动物在上面行走会跌下,但跌下的机会大于50%:2分;
动物在正常侧身体的帮助下可以跳上平衡木条;但是瘫痪侧的后肢不能够帮助身体向前移动:3分;
动物无法在平衡木条上行走,但是可以坐在木条上:4分;
将动物放在木条上,动物很快会掉落下来:5分。
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